Quantcast
Channel: Лев Московкин
Viewing all articles
Browse latest Browse all 30134

Владимир Гвоздев: Замечательная работа – Ольга Донцова открыла анти-апоптозый белок TERP

$
0
0
Руководитель отдела молекулярной генетики животных Институт молекулярной генетики РАН (бывший РБО НИИ им.Курчатова) Владимир Алексеевич Гвоздев проводит сегодня семинар памяти Хесина.
Завлабораторией химии природных соединений Ольга Анатольевна Донцова. «Теломера-теломераза». Теломераза: необычные свойства и мишень для противоопухолевой терапии.
Семинары памяти Хесина Гвоздев проводит каждый год в конце марта. Они неизменно показывают точки роста отечественной молекулярной генетики – надо отдать должное харизме и авторитету Гвоздева. Выбор и оценка Гвоздева безошибочный и адекватный, в отличие от редакции Nature или Нобелевского комитета, запутавшегося в политической коррупции и указаниях Вашингтона.
Если б это было не так, сам Гвоздев был бы дважды Нобелевский лауреат – за МЭ (МДГ, совместно с Евгением Ананьевым) и затем за т.н. короткие РНК с регуляторной ролью.
Сейчас ситуация особо сложна. В ответ на успехи отечественной науки и в не меньшей степени журналистики. Россия становится источником истины и это опасно для источника навязанных миру неадекватных решений. Опасна не столько внешняя угроза, сколько традиционная внутренняя агрессивность ученых друг к другу. Дважды потерявший предмет исследований Лев Животовский с правдивой книжкой «Неизвестный Лысенко» больше враг, чем внешний источник, насыщающей информационное поле России черным PR против российской науки и Академии на фоне абракадабры типа сегодняшней статьи «Генная инженерия может вызвать новые болезни» на 12 полосе сегодняшнего глобализующего издания «Метро».
Их науку воруют, они друг с другом собачатся.
Газета «Метро» раздается бесплатно, отечественные СМИ убивают. В журналистике уже замечена консолидация с мобилизацией, беспартийная и свободная от идеологии наподобие тому что было на предприятиях после бегства из Москвы партийно-советской шоблы. Ученые продолжают игры в черно-белую непримиримость. Внешней угрозы они не видят. Собственных достижений не видят. А если видят, то не ценят. А если ценят, то по принципу: опубликует Nature или нет. Слушают «Эхо Москвы», стараются не замечать реформы Академии, хотя дармоеды из ФАНО в покое не оставляют точечно нападая именно на точки роста науки.
Ученые в долгу перед человечеством. Они добровольно оскопили свою науку и оставили человечество без прогноза будущего. В итоге сами стали первой мишенью с неадекватными и манипулируемыми индексами Хирша и импакт. Однако наука не умерла и развивается. Надо понимать, что генетику в этом формате губят сорок лет и тем не менее личности уровня Гвоздева и Хесина в ней не переводятся.
На семинар собралось около трех десятков человек. Ольга Донцова рассказывала так, как поэтессы 60-х читали стихи. Выглядела странно, но очень художественно.
Конспект
Гвоздев: проблема чрезвычайно интересная. Я думаю что если бы Хесин не ушел и з жизни в 1985 году а застал начало работ по теломере и теломеразе то отметил бы в своей книге Непостоянство генома эти вопросы. Мы немножко разошлись. В этом году исполняется ровно 30 лет открытия фермента с активностью терминальной трансферазы, навешивающей на кончик хромосомы. Донцова говорить что чуть раньше этими же дамами которые получили Нобелевскую премию. Ей виднее.
Донцова видела Хесина один раз когда попала на школу в Мозженку. Это человек большой харизмы.
Сотрудники, которых назвала Донцова: Мария Зверева Александр Малявко Дарья Василькова Дулат Аджибек Дмитрий Скворцов Елена Смекалова Тимофей Зацепин.
Лет 15 назад решили заняться теломеразой. Не очень согласна с термином терминальная трансфераза. Теломераза обратная трнаскриптаза. Теломеры комплексы. Когда укорачиваются ничего хорошего. Клетка впадает в кризис и апоптоз. В подавляющем большинстве эукариот поддерживает длину теломер теломераза. Состоит из двух единиц. С возрастом теломеразная активность падает. Поддерживается в половых и стволовых клетках.
Самый злостный рак теломеразная активность. Неограниченное деление.
Болезни связанные с нарушением теломеразной активности: кератоз.
Причина болезней мутации в генах теломеразного комплекса.
Теоломпераза синтезирует повторы ДНК на РНК-матрице, присоединяясь к 3‘ – концу ДНК. Чем больше повторов синтезирует тем больше у нее процессивность.
Теломеразы человека и дрожжей отличаются по длине. У всех теломераз есть триплекс.
Дуплекс надо разрушить и перенести на новое место. Как это происходит неизвестно. Во всех теломеразных РНК есть ограничитель которые не дает читать дальше нужного повтора. Остальные элементы которые отвечают за регуляцию посадку на теломеру сильно различаются.
Каталитическая субъединица обратная транскриптаза.
Человеческая теломераза димер с зеркальной симметрией.
Уровни регуляции теломеразы:
- уровень экспрессии
- процессинг РНК
- транспорт внутри ядра и в цитоплазму
- сборка теломеразного комплекса
- взаимодействие и активация на теломере.
На промотор влияет много разных факторов. В процессе дифференцировки происходит подавление теломеразной активности.
Промотор теломеразной РНК является конститутивным. Вы везде ее найдете.
Блокирование апоптоза в ответ на стресс, хроническое воспаление.
Ходит в митьохондрию зачем неизвестно.
Большое количество сплайс форм обнаружено. Альтернативный сплайсинг. Ингибирование теломеразной РНК. Чтобы теломераза работала in vivo необходимы различные белки. Отвечает за транспорт.
3’ конец в неделящихся клетках защищен и спрятан глубоко в теломере.
В литературе долго обсуждались T-петли. Электронный микроскоп видит некий заворот.
TEN домен определяет процессивность и участвует в активизации теломеразы на теломере. TPP1 счетчик длины теломер.
Процесс регуляции длины теломер неясен. Садится в конце S-фазы. Единственное что доказано в конце S_фазы выходит из телец Кохаля садится на теломеру и начинает работать.
TERRA RNA нужна для того чтобы теломераза попала к теломере. РНК с теломерными повторами регулирует длину теломер.
Все клетки от стволовых, активность теломер падает.
Мыши в отсутствии теломер долго жить не могут,
В США много фирм которые секвенируют теломеры, страховка ниже.
С возрастом у человека теломеры укорачиваются. Для рыб показана связь продолжительности жизни с длиной теломер. У мыши временная реактивация теломер убирает признаки старения. На 13% дольше такие мыши жили.
Чем активнее теломераза тем больше вероятность рака.
В отсутствии теломеразы возможны альтернативные пути поддержания длины теломер.
Немного о наших работах.
Термо-толерантне дрожжи живут при 50 градусах. Самое интересное когда начали изучать активность in vitro оказалось не может остановиться и добавляет лишние буквы. 90% на конце буква dT.
Восстановление комплементарности с матрицей приводит к неограниченному удлинения. Включение дополнительного нуклеотида ограничивает длину теломер.
Есть еще некий белковый ограничитель.
Процессинг теломеразной РНК. Теломеразная РНК дрожжей может процессироваться разными способами в т.ч. с образованием большого транскрипта.
В модельных системах правильный процессинг. Транскрипция не заканчивается на 500 нуклеотидах.
Были сделаны конструкции где IRES отодвинут за две тысячи.
Что нужно чтобы процессинг происходил? Сделали конструкции где нет и стали вставлять кусочки.
Слабый сигнал полиаденилирования усиливается полноразмерной hTR.
Предположение что разрезается а транскрипция продолжается.
Терапия в раковых клетках ингибировать теломеразу. На последней стадии клинической практики белок GNR63L его недостаток надо залить много.
Олигонуклеотидные химеры. Химеры ингибируют теломеразу in vitro. In vivo такого ингибирования нет.
Наличие линкера очень важно активность возрастает.
Новая работа в нашей лаборатории Маша Рубцова рисковый проект hTR содержит открытую рамку считывания. У разных млекопитающих достаточно консервативен. Концентрируется в околоядерной структуре. hTERP.
Экспрессия теломеразной РНК защищает клетки от апоптоза. Если вводим преждевременный стоп-кодон или меняем стартовый кодон этого не происходит.
Гипотеза: теломеразная РНК присутствует в клетках и защищает от апоптоза.
Нами обнаружен новый белок синтезируется с теломеразной РНК
Вопросы
Есть ли коммерческие образцы? – У нас договор с Институтом здоровья. Любой лейкоз на ранней стадии дает всплеск теломеразной активности. Рак шейки матки тоже проверяют сначала теломеразную активности.
Наличие теломеразной РНК защищает, если не очень много.
TERP присутствует в разных клетках с теломеразной активностью. Похож на один из. Но мы не знаем какие каскады.
Человеческую теломеразу кто-нибудь видел активную? – Попытки есть. Если начнете с нескольких литров культуры человеческих клеток. Можно дочистить до каталитической субъединицы. Если экспрессировать отдельно белок и РНК примерно 2%. Что там с реконструкцией мы не знаем. Трудно это все изучать, если у вас всего сто молекул теломеразы в клетке.
Гвоздев: Альтернативный путь не работает? – Он возникает. Низкомолекулярные ингибиторы не работают. Как правило ингибиторы полимераз. Хорошо убивает рак в стволовых клетках.
Андрей: – Только как ДНК зависимая РНК-полимераза в наших экспериментах in vitro работала.
Гвоздев: Знаете ли вы другие случаи чтобы некодирующая РНК работала? – У лягушек что-то связанное со скелетными мышцами. Примеры стали появляться. – Гвоздев я еще знаю пример.
Я не знаю что нам скажет журнал Nature
Мы индуцировали апоптоз. Стабильная клеточная линия.
Л.М.: Не связано с теломеразной активностью рак есть? – Рак мозга у человека.
Гвоздев: Замечательная работа.
Алеша: В массе раковых клеток есть стволовые клетки. – Раки которые происходят из стволовых клеток на порядок выше теломеразная активность. Из соматических теломера короткая.
Гвоздев: Стволовые в опухолях хорошо отличаются? По моему нет.
- Вы знаете сколько там полимераз есть?
Гвоздев: Я не знаю насколько усвоен результат аудиторией, но то что обнаружен белок который как на матрице образуется анти-апоптозый белок, это является общебиологическим открытием.

http://cyberleninka.ru/article/n/funktsii-telomerazy-udlinenie-telomer-i-ne-tolko
Acta Naturae (русскоязычная версия)
ВыпускN2 / том 4 / 2012
Аннотация
научной статьи по биологии, автор научной работы — РУБЦОВА М.П., ВАСИЛЬКОВА Д.П., МАЛЯВКО А.Н., НАРАЙКИНА Ю.В., ЗВЕРЕВА М.Э., ДОНЦОВА О.А.
На концах хромосом находятся специальные структуры теломеры, от длины которых зависит пролиферативный потенциал клетки, или число делений, которые клетка может совершить до своей гибели. Длину теломер поддерживает фермент теломераза. К примеру, в эмбриональных клеточных линиях теломераза активна, и длина теломер в них остается постоянной, т.е. эти клетки обладают неограниченным потенциалом деления. В стволовых клетках активность теломеразы ниже, что позволяет лишь частично компенсировать укорачивание теломер. В соматических клетках активность теломеразы обычно отсутствует. Укорачивание теломер продолжается до тех пор, пока теломера не теряет способность защищать концы хромосомы, тогда клетка достигает предела Хейфлика и переходит в состояние старения, а после этого наступает кризис, сопровождающийся массовой гибелью клеток. Уцелевшие клетки превращаются в иммортальные или в злокачественные (раковые), способные к неограниченному делению и поддержанию длины теломер (как правило, с помощью теломеразы). Теломераза является обратной транскриптазой. Она состоит из двух основных компонентов теломеразной РНК (TER) и обратной транскриптазы (TERT). TER относится к некодирующим РНК, она содержит участок, служащий матрицей для синтеза теломер. В последнее время появляется все больше работ об альтернативных функциях компонентов теломеразы. В настоящем обзоре суммированы данные о структуре, биогенезе и функциях теломеразы.
Научная библиотека КиберЛенинка: http://cyberleninka.ru/article/n/funktsii-telomerazy-udlinenie-telomer-i-ne-tolko#ixzz3Vq0YuJ5P

Л.М.: Хорошо помню как над Оловниковым смеялись. Потом признали, но Нобелевскую премию дали не ему.
Сейчас в позитивной части нашего развития – люди стали умнее и лучше, идет переосмысление прошлых достижений, междисциплинарность и запрос на генетику.
В прошлом созыве Думы давили, теперь наоборот. Ответа на запрос пока нет.
Тем временем идет не просто признание запрещенного ранее – мобильные элементы, горизонтальный перенос, уникальные события, симбиозогенез, самоорганизация. Дальше видимо Vis vitalis и роль турбулентности в волнах жизни Четверекова. Идет широкая конвергенция со стиранием грани аналогии и гомологии.
Вопросы в том, имеет ли данная тема отражение в общественном?
В негативном тренде м.б. со мной не согласятся, тоже позитив. Идет глобальная война форматов, наиболее обостренная в науке и конкретно в генетике. Идет война за ниши, за научные направления, даже за слова – кластер, конвергенция, междисциплинарность. В публичном поле мелькают одни и те же фигуры. Один взял на себя роль высшего судьи, из другого делают проект «русский Дарвин». Развивается направление социофизики.
Происходящее в мире людей остается неописанным – кроме Московкина – кроме шуток.
Я в меру сил науку защищаю, но понимания нет. Если б я не был защищен, сожрали бы с концами. Давно, как эволюциониста Юрия Чайковского или адвоката Наталью Андрееву.
2015 год: ситуация накаляется. Не в науке, а вообще. Сложившийся формат мира людей держится на системе манипуляций, угроз, подкупа и бесконечной череды политических разменов. Четыре науки полностью выхолощены и подавлены.
Самыми страшными вопросами стали: пучковое оружие, могила Данилевского на земле Порошенко в Мшатке, что есть информатика и почему генетику для школьников ведет не кафедра генетики. Что за пропаганда уводит лучших студентов с кафедры генетики?
Мы как нормальные герои пошли в обход через болото журналистики. По теории и практике СМИ получилась та же эволюционная генетика. Предмет изучения не играет роли – законы, стихи, реформа Академии, мобильные элементы или отношение к ним. Итог инвариантен. Турбулентность синхронизует мир и повышает роль редких и уникальных событий. Отсюда значимость Симона Шноля ему 85 21 марта и Юрия Чайковского.
Товарищи ученые всегда делились на два непримиримых класса. Предмет спора м.б. разный: слушают ЭМ или нет, уверены все зло от Думы или в е отечественное дерьмо начиная с науки, двигаются или нет МДГ, что Т-Р предатель, Шноль или Оловников профанаторы, Чайковский и Московкин лжеученые мерзавцы. Мне в контексте важно: ваше направление науки имеет смысл в своих пределах или эволюция одна на всех независимо от предмета?. Новый русский Дарвин Александр Марков закрыл своим телом эволюцию человека – нет ее. Кирилл Еськов уверен что если hard человека застыл, но soft вариабелен. На самом деле одни подвержены манипуляциям, а кто-то нет.

Viewing all articles
Browse latest Browse all 30134

Trending Articles